目的构建一种比率型荧光传感器, 用于尿液miR-182-5p的检测, 为膀胱癌临床诊断提供新途径。方法共纳入2024年1—12月31例经病理确诊且未接受任何治疗的膀胱癌患者、23例健康体检者和14例膀胱部位良性疾病患者。理性设计搭载链(L1)、供体链(T1)、受体链(F1)及放大元件(A1-A2)等功能核酸探针, 采用自组装策略构建比率型荧光传感器。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光光谱验证链置换反应可行性;对传感器各元件浓度与反应时间等关键参数进行优化, 确定最佳反应条件;通过分析不同浓度靶标的响应信号, 测定传感器的线性检测范围并计算检测限;利用非靶标序列评估传感器的特异性识别能力;最后, 将传感器应用于临床尿液样本检测, 并通过受试者工作特征曲线分析验证传感器的诊断效能。结果构建的比率型荧光传感器, 能够特异性识别尿液中的miR-182-5p, 并触发信号循环放大, 从而实现对标志物的高灵敏检测。在10 fmol/L至100 pmol/L范围内, 传感器对miR-182-5p表现出优异线性响应(R2=0.997 8), 检测限达0.39 fmol/L, 并且具有高度特异性;通过对临床尿液样本检测, 验证该传感器能有效区分膀胱癌患者与健康对照者(P<0.001), ROC曲线下面积达0.99。结论本研究成功构建基于链置换反应的比率型荧光传感器, 可实现对尿液miR-182-5p的灵敏检测, 在膀胱癌无创诊断中展现出优异性能。
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